Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии


БАННЕР 258x100.png

DI_Banner_258x100_detInf_22.png

Baner_IB-2021_265x130-1.png


баннер-258x100.jpg

onkologi_banner_265х130.jpg

265х130.jpg

banner-BF_265x130.jpg




Использование мутированного варианта человеческой деоксицитидинкиназы в качестве репортерного гена для оценки адоптивной Т-клеточной терапии

Целью данной работы явилась оценка функциональной активности и возможности неинвазивного мониторинга опухолеспецифических Т-клеток, трансдуцированных репортерным геном человеческой природы. Т-клетки, полученные от здорового донора, были трансдуцированы химерным антигенспецифичным рецептором (chimeric antigen receptor – CAR) к мембранному антигену рака предстательной железы человека (human prostate-specific membrane antigen – hPSMA) и репортерным геном человеческой деоксицитидинкиназы (dCKDM). Чувствительность трансдуцированных Т-клеток к ганцикловиру и цитaрабину оценивали с помощью методики определения активности митохондриальной дегидрогеназы (WST-тест), специфическую цитотоксичность трансдуцированных Т-клеток – с помощью количественного определения выделения глицераледегид-3-фосфатдегидрогеназы in vitro (aCella-TOX). Опухоль в легком формировалась после введения мышам клеток рака предстательной железы человека, экспрессирующих hPSMA. Позитронно-эмиссионную томографию (ПЭТ) с 2-флюоро-2’-деокси-1-β-D-арабинофуранозил-5-этилурацилом, меченным изотопом 18F (18F-FEAU), проводили в день введения Т-клеток и на 3-й день после введения. Экспрессия генов анти-hPSMA CAR и dCKDM была подтверждена в 75% трансдуцированных лимфоцитов. Трансдукция Т-клеток CAR и dCKDM не влияла на их цитолитическую активность в отношении hPSMA+-клеток-мишеней. T-клетки, трансдуцированные dCKDM, были чувствительны к цитарабину, но не к ганцикловиру. При ПЭТ было получено отчетливое накопление Т-клеток в опухолях легкого у животных после внутривенного введения лимфоцитов, трансдуцированных dCKDM, в день введения и на 3-й день после введения, что было подтверждено иммуногистохимически.

Ключевые слова: репортерный ген, деоксицитидинкиназа, позитронно-эмиссионная томография, радиоактивно меченная проба 18F-FEAU, Т-клетки

Стоимость статьи: 100 ք
Получить доступ
Пароль:

Яндекс.Метрика